久久99爰这里有精品国产-久久99这里只有精品国产-久久99中文字幕-久久99中文字幕久久-国产福利免费观看-国产福利免费视频

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 人 (Human) 內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 檢測試劑盒
人 (Human) 內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 檢測試劑盒
更新時間:2011-06-16   點(diǎn)擊次數(shù):2025次

人 (Human) 內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 檢測試劑盒

 

本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:血清或血漿
 
試驗(yàn)原理
ES試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知ES濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將ES和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ES的濃度呈比例關(guān)系。
 
試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份(2-8保存)
96孔配置
48孔配置
配制
96/48人份酶標(biāo)板
1塊板(96T)
半塊板(48T)
即用型
塑料膜板蓋
1塊
半塊
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品:240pg/ml
1瓶(0.6ml)
1瓶(0.3ml)
按說明書進(jìn)行稀稀
空白對照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
即用型
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液
1瓶(5ml)
1瓶(2.5ml)
即用型
生物素標(biāo)記的抗ES抗體
1瓶(6ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
親和鏈酶素-HRP
1瓶(10ml)
1瓶(5.0ml)
即用型
洗滌緩沖液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
按說明書進(jìn)行稀釋
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
終止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
即用型
標(biāo)本稀釋液
1瓶(12ml)
1瓶(6.0ml)
即用型

 
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
 
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
 
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
 
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
 
試劑的準(zhǔn)備
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:

240 pg/ml
(6號標(biāo)準(zhǔn)品)
原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
120 pg/ml
(5號標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60 pg/ml
(4號標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30 pg/ml
(3號標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15 pg/ml
(2號標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5 pg/ml
(1號標(biāo)準(zhǔn)品)
100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0 pg/ml
(空白對照)
原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

 
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
 
 
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
建議使用的實(shí)驗(yàn)方案

 
標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)
 
A
240
240
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
B
120
120
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
C
60
60
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
D
30
30
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
E
15
15
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
F
7.5
7.5
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
G
0
0
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
H
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品
樣品

 
 
局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
 
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
 
結(jié)果 判 斷
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD
 
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的ES標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的ES含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
 
3檢測值范圍:0-240pg/ml
 
4、敏感度: 0.1 pg/ml
 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
久久精品免视看国产明星| 天天色色色| 沈樵在线观看福利| 亚洲第一视频在线播放| 青青久热| 亚洲精品久久玖玖玖玖| 日日日夜夜操| 日本特黄特色aaa大片免费| 日本特黄特色aa大片免费| 国产极品精频在线观看| 99色视频在线观看| 国产原创视频在线| 国产福利免费视频| 国产高清视频免费观看| 日日夜夜婷婷| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 九九干| 999久久66久6只有精品| 午夜在线观看视频免费 成人| 久久国产精品永久免费网站| 精品国产一区二区三区久| 亚洲精品影院一区二区| 一级毛片视频免费| 国产高清视频免费| 成人免费观看的视频黄页| 国产高清视频免费| 欧美激情影院| 国产91精品一区二区| 国产一区二区精品久久| 精品美女| 国产一区精品| 久久成人亚洲| 久久国产一区二区| 黄视频网站在线看| 国产成a人片在线观看视频| 久久精品店| 精品视频在线看 | 久久精品店| 亚欧成人乱码一区二区| 国产亚洲精品成人a在线| 久久精品店| 成人免费一级纶理片| 国产成人欧美一区二区三区的| 久久精品人人做人人爽97| 久久成人性色生活片| 日韩专区亚洲综合久久| 国产一区二区精品久久| 日韩免费片| 久草免费在线观看| 精品在线视频播放| 久久成人性色生活片| 日韩在线观看视频网站| 999久久66久6只有精品| 国产伦久视频免费观看视频| 欧美a免费| a级黄色毛片免费播放视频 | 国产激情一区二区三区| 亚洲第一视频在线播放| 国产激情视频在线观看| 四虎影视库| 国产麻豆精品视频| 国产一区二区精品久久| 二级特黄绝大片免费视频大片| 亚洲第一色在线| 日韩在线观看视频网站| 免费国产在线视频| 韩国三级香港三级日本三级la| 欧美大片毛片aaa免费看| 国产成人欧美一区二区三区的| 久久99中文字幕| 亚洲精品影院一区二区| 国产国语对白一级毛片| 国产91精品一区二区| 日本免费区| 日韩在线观看免费完整版视频| 九九精品在线播放| 久久国产精品永久免费网站| 美女免费毛片| 成人av在线播放| 欧美另类videosbestsex高清| 999精品视频在线| 天天做日日爱| 91麻豆精品国产综合久久久| 国产网站免费| 久久精品免视看国产成人2021| 一a一级片| 国产高清视频免费| 日本伦理片网站| 九九干| 成人a级高清视频在线观看| 麻豆系列国产剧在线观看| 久草免费在线视频| 欧美一区二区三区性| 日本免费区| 国产一区二区精品尤物| 毛片高清| 日韩中文字幕一区二区不卡| 欧美日本免费| 999久久66久6只有精品| 久久精品免视看国产成人2021| 欧美a级大片| 青青青草影院 | 亚洲www美色| 黄色短视频网站| 国产伦久视频免费观看 视频 | 国产极品白嫩美女在线观看看| 免费国产在线观看| 超级乱淫黄漫画免费| 成人影院久久久久久影院| 国产精品自拍在线| 韩国三级一区| 日本乱中文字幕系列| 欧美一区二区三区性| 日本伦理黄色大片在线观看网站| 欧美a免费| 亚洲天堂免费| 日本特黄特黄aaaaa大片| 一级毛片看真人在线视频| 久草免费在线视频| 91麻豆精品国产综合久久久| 午夜在线影院| 国产福利免费观看| 日本特黄特色aaa大片免费| 欧美另类videosbestsex| 四虎论坛| 国产成a人片在线观看视频| 精品久久久久久中文字幕一区 | 中文字幕Aⅴ资源网| 国产网站麻豆精品视频| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 99热热久久| 国产亚洲精品成人a在线| 日日夜人人澡人人澡人人看免| 成人高清免费| 黄视频网站免费观看| 四虎论坛| 国产一区二区精品| 久久精品免视看国产成人2021| 成人影院久久久久久影院| 日韩中文字幕在线播放| 国产精品1024永久免费视频| 91麻豆精品国产片在线观看| 天天做日日爱| 二级特黄绝大片免费视频大片| 午夜在线影院| 欧美国产日韩一区二区三区| 你懂的在线观看视频| 精品视频在线观看一区二区三区| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 国产福利免费观看| 国产美女在线观看| 国产成人女人在线视频观看| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 青青久久精品国产免费看| 久久精品人人做人人爽97| 麻豆系列国产剧在线观看| 亚洲 男人 天堂| 黄视频网站在线看| 韩国毛片免费大片| 国产伦精品一区二区三区无广告| 一级片片| 国产网站免费在线观看| 欧美一级视频免费| 国产伦理精品| 成人高清视频在线观看| 久久99青青久久99久久| 91麻豆tv| 四虎影视库| 九九精品在线播放| 国产不卡在线播放| 一级女人毛片人一女人| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 国产一区二区精品在线观看| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 午夜在线影院| 精品视频在线观看一区二区三区| 美女免费精品高清毛片在线视| 九九精品影院| 欧美日本韩国| 亚洲女人国产香蕉久久精品 | 免费一级生活片| 日韩中文字幕一区二区不卡| 国产一级强片在线观看| 国产高清在线精品一区二区| 一级女人毛片人一女人| 国产麻豆精品| 国产网站免费| 欧美大片a一级毛片视频| 精品视频在线看 | 黄色免费网站在线| 免费的黄视频| 色综合久久天天综合观看| 色综合久久天天综合观看| 亚洲 男人 天堂| 欧美激情一区二区三区视频| 亚欧成人乱码一区二区| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 久久国产精品自线拍免费| 日日日夜夜操| 999久久久免费精品国产牛牛|